テクニカルインフォメーション

SDS-PAGEとウエスタンブロッティングのセレクションガイド

セレクションガイド (1).png

アトー定番 スタンダードセレクション

機能性・操作性ばつぐん!
アトーを代表する一番人気の電気泳動槽とブロッティング装置、電源装置です。
リーズナブルな価格で応用範囲も広く、これから始める人からスペシャリストまでオススメできます。

アトー定番の電気泳動&ブロッティング装置&ゲル
用途 製品コード 型式 名称 価格
電気泳動槽

AE-6530 top_360pix.jpg

・標準的ミニサイズゲル用の電気泳動槽
・同時にミニサイズゲル2枚泳動可能
・ゲルサイズ 8x9cm
※プレキャストゲル用(P)と自作ゲル用(M)の2種類があります
2321900
2321905
AE-6530M
AE-6530P
ラピダス ミニスラブ電気泳動槽 52,800円
電源

II-300_productmain.jpg

・アトー No1の人気者
・電源装置 小型・軽量タイプ
・電圧:1~300V(max.50W)
・電流:1~400mA(max.50W)
2311175 AE-8135 マイパワーⅡ 300 92,800円
ブロッター

2M_productmain.jpg

・ミニサイズゲル2枚まで同時ブロッティング可能
・セミドライブロッティング装置
2322466 WSE-4025 ホライズブロット2M 128,000円
ゲル

e-PAGEL HR-製品画像1_png.png

・標準ミニサイズサイズ(90×83mm)のポリアクリルアミド既製ゲル
・高速泳動対応 300V定電圧で35分
・7.5%/10%/12.5%/15%/5-20%/10-20%
2331970
2331950
2331955
2331960 など
  e-PAGEL HR 18,800円/箱
作製器

AE-6401 top_360pix.jpg

・ミニサイズゲル作製キット
・ゲルサイズ90×85mm
・ゲル厚1mm用(ゲル2枚分)
2393010 AE-6401 ミニスラブゲル作製キット 28,800円
その他のオススメ
用途 製品コード 型式 名称 価格
ブロッター

2M_productmain.jpg

ミニサイズゲル2枚まで同時ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置 2322496 WSE-4125 パワードブロット 2M 218,000円
試薬

WSE-4057_製品画像①.jpg

セミドライブロッティング用トランスファーパック
(ミニゲル10枚分)
2322443 WSE-4057 QBlot Kit M
キューブロットキットM
19,800円
データ例1:ゲルの違いと泳動パターンの比較

スタンダード①.png

上図は一般的な自作ゲル(Laemmli 5-20% gel,  375 mM Tris/pH8.8ゲル緩衝液使用)、プレキャストゲルのe-PAGEL HR (EHR-T520L)e-PAGEL(E-T520L)を使用して、分子量マーカー (EzProtein Ladder, EzStandard)、ニワトリ筋抽出液、ヒト血漿タンパク質をEzRun(Tris/Gly/SDSバッファー)で泳動したパターンを示しています。
e-PAGEL HRはLaemmli法に準拠した自作ゲルやe-PAGELの約半分の時間で、泳動パターンやバンド移動度を保持したままで、より明瞭に分離できるようになります。

データ例2:高速電気泳動の影響

スタンダード② のコピー.png

上図は 高濃度(15%アクリルアミド)のプレキャストゲルのe-PAGEL HR (EHR-T15L)e-PAGEL(E-T15L)を使用して、ヒト血漿タンパク質、ニワトリ筋抽出液、分子量マーカーなどを電気泳動したパターンを示しています。
e-PAGELは高電圧条件で泳動するとスマイリングします(中央)が、e-PAGEL HRは高濃度ゲルでも高電圧(300V)条件下で、スマイリングすることなく、良好にバンドが分離できることが判ります(左)。

データ例3:転写効率の比較

スタンダード⓷-2こぴー.png

上図は e-PAGEL HR (EHR-T520L)および他社製の既製ゲルを使用して、ヒト血漿タンパク質、ニワトリ筋抽出液、分子量マーカーなどを電気泳動で分離した後に、EzFastBlotまたはトランスファーパックで転写した結果を示しています。
左は転写した膜をEzStain AQuaMEMで染色した結果で、右は転写後のゲルをEzStain AQuaで染色した結果であり、他社製品と同等以上の転写効率が確認されました。
ゲルにほとんどバンドが残存していないことから、EzFastBlotの転写効率が高いだけではなく、e-PAGEL HRが転写にも適したゲルであることが判ります。

安価で新規導入にオススメ

これから始める人でも簡単に電気泳動とブロッティングが始められるお手頃価格の装置や試薬をご紹介します。
ボタン一つのシンプル操作で電気泳動もブロッティングもスタートできます。
実験の初期費用を抑えたい、試しに電気泳動やウエスタンブロッティングをしてみたい方に特にオススメです。

シンプル操作の電気泳動・ブロッティング・ゲル
用途 製品コード 型式 名称 価格
電気泳動装置

WSE-1150 top_360pix.jpg

・標準的ミニサイズゲル用の電気泳動槽
・同時にミニサイズゲル2枚泳動可能
・ゲルサイズ 8x9cm
※プレキャストゲル用(P)と自作ゲル用(M)の2種類があります
2321670
2321650
WSE-1150P
WSE-1150M
パジェランAce 128,000円
ブロッター

Ace_productmain.jpg

ミニ/コンパクトサイズゲル1枚用の高速ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置 2322490 WSE-4115 パワードブロットAce 148,000円
ゲル

e-PAGEL-製品画像1.jpg

・標準ミニサイズサイズ(90×83mm)のポリアクリルアミド既製ゲル
・アトーで最も安価な既製ゲルです
・7.5%/10%/12.5%/15%/5-20%/10-20%
2331830
2331800
2331810
2331820 など
  e-PAGEL 15,800円/箱
作製器

AE-6401 top_360pix.jpg

・ミニサイズゲル作製キット
・ゲルサイズ90×85mm
・ゲル厚1mm用 (ゲル2枚分)
2393010 AE-6401 ミニスラブゲル作製キット 28,800円
その他のオススメ
用途 製品コード 型式 名称 価格
電源

II-300_productmain.jpg

・アトー No1の人気者
・電源装置 小型・軽量タイプ
・電圧:1~300V(max.50W)
・電流:1~400mA (max.50W)
2311175 AE-8135 マイパワーⅡ 300 92,800円
試薬

WSE-4057_製品画像①.jpg

セミドライブロッティング用トランスファーパック
(ミニサイズゲル10枚分)
2322443 WSE-4057 QBlot Kit M
キューブロットキットM
19,800円
データ例1:アクリルアミド濃度と泳動パターン

シンプル操作① のコピー.png

上図はヒト血漿タンパク質、ニワトリ筋抽出液、分子量マーカーなどをアクリルアミド濃度のe-PAGELを使用し、EzRun で電気泳動した結果です。
バンドの分子がシャープで、良好に分離されることが判ります。

データ例2:AE-1465 EzFastBlot を用いたウエスタンブロッティング

シンプル操作②.png

上図は e-PAGEL (E-T520L)を使用して、ヒト血漿タンパク質、ニワトリ筋抽出液、分子量マーカーなどを電気泳動で分離した後に、EzFastBlotで転写した結果を示しています。
左は転写した膜をEzStain AQuaMEMで染色した結果で、右は転写後のゲルをEzStain AQuaで染色した結果です。
ゲルにほとんどバンドが残存していないことから、EzFastBlotにより高効率で転写されたことが判ります。

安価で新規導入にオススメ

セレクションガイド3.png

アトーの技術の最高峰!多機能・高性能・拡張性の高いハイエンドプロダクトです。
安全性も抜群の高速泳動にも高速ブロッティングにも対応したタッチパネル電源をはじめ、アトー推奨の装置をご紹介します。
電気泳動とウエスタンブロッティングの効率と性能にこだわりのある方に特にオススメです。

最上級の電気泳動&ブロッティング装置&ゲル
用途 製品コード 型式 名称 価格
電気泳動槽

WSE-1165 top_360pix.jpg

・アクリル製ミニサイズゲル用の電気泳動槽
・同時にミニサイズゲル2枚泳動可能
・ゲルサイズ 8x9cm
2322197 WSE-1165 ラピダス ミニスラブ 88,000円
電源

PowerStation-Ghibli-I_productmain.jpg

・タッチパネル式電源装置
・高速電気泳動・高速ブロッティングにも対応
・電圧:0~500V(max.200W)
・電流:0~3000mA (max.200W)
2311130 WSE-3100 PowerStation Ghibli I 248,000円
ブロッター

4M_productmain.jpg

・ミニサイズゲル4枚まで同時ブロッティング可能
・セミドライブロッティング装置
2322476 WSE-4045 ホライズブロット4M 168,000円
ゲル

UH-T420 のコピー.png

・新規架橋剤使用ミニサイズゲル(90×83mm)のポリアクリルアミド既製ゲル
・高分子タンパク質・Native-PAGEに最適
・高速泳動にも対応
・300V定電圧で35分
・5%/3-10%/3-14%/4-20%
2331300
2331302
2331306
2331304 など
  u-PAGEL H 25,800円/箱
作製器

AE-6401 top_360pix.jpg

ミニサイズゲル作製キット
ゲルサイズ90×85mm
ゲル厚1mm用(ゲル2枚分)
2393010 AE-6401 ミニスラブゲル作製キット 28,800円
その他のオススメ
用途 製品コード 型式 名称 価格
ブロッター

2M_productmain.jpg

ミニサイズゲル2枚まで同時ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置 2322466 WSE-4025 ホライズブロット2M 128,000円
試薬

EzFastBlot-HMW_productmain(240206).jpg

高分子量タンパク質(200kDa以上)にも適したセミドライブロッティング用バッファー(ミニゲル10枚分) 2332595 WSE-7210 EzFastBlot HMW 12,800円
データ例1:u-PAGEL Hと泳動パターン

ハイエンド① のコピー.png

上図はu-PAGEL Hを使用して分子量マーカー、ニワトリ筋抽出液、HeLa細胞抽出液、コラーゲンなどをEzRun で電気泳動した結果です。
200kDa以上の高分子量タンパク質のバンドの分子がシャープで、良好に分離されることが判ります。

データ例2:高分子コラーゲンバンドの分離パターン

ハイエンド② のコピー.png

左図は u-PAGEL Hを使用して、コラーゲンを分離した結果を示しています。他社のゲルと比較して、u-PAGEL Hは高分子のバンドがスメアになることなく、短時間で明瞭に分離されることが判ります。

【泳動条件】
u-PAGEL H:300V c.v., 30~45分
他社ゲル:150V c.v., 61分

 

 

 

 

   

 

データ例3:高分子タンパク質のウエスタンブロッティング

ハイエンド⓷ のコピー.png

左図は大腸がん由来細胞株の抽出液を分離し、それぞれの抗体でウェスタンブロッティングを行った結果を示しています。u-PAGEL Hは600kDa以上のタンパク質を良好に分離できるだけではなく、ポアサイズが均一で大きいことから、セミドライブロッティングでも高効率に転写することができます。
  
【サンプル】
左からColo205, HCT116, SW620, HeLa, HepG2細胞抽出液
【転写条件】
EzFastBlot HMW:24V c.v., 30分
【検出】
EzWestLumiOne
LuminoGraphⅢ系撮影装置





 

 

データ例4:Native-PAGEによる解析にも最適

 

ハイエンド④ のコピー.png

上図は様々なNative-PAGE法で分離した結果を示しています。
同じサンプル、同じゲルを使用しても、泳動法により(泳動バッファーを変えるだけ)バンドの分離パターンが異なり、実験目的により使い分けることで解析の幅が広げられます。
  
【泳動バッファー】
左から
HR-CN:WSE-7056 EzRun ClearNative
BN:WSE-7057 EzRun BlueNative
Native:WSE-7055 EzRun TG
SDS:AE-1410 EzRun

ハイエンド⑤ のコピー.png


上図はニワトリ肝のミトコンドリア抽出液をHR-CN-PAGEで泳動し、OXPHOS活性を活性染色で検出した結果を示しています。
  
【酵素活性】
CoxⅠ:NADHデヒドロゲナーゼ
CoxⅡ:コハク酸デヒドロゲナーゼ
CoxⅣ:チトクロムCオキシダーゼ
CoxⅤ:ATP合成酵素

短時間で実験したい

ゲルサイズが60×60mmの小さいサイズなので、電気泳動もブロッティングも最短各10分で済ませることができます。
短時間で手早く実験をしたい方にオススメです。
さらに装置が手のひらサイズで、実験台の上でも場所を取らないので「1人1台」「各実験台に1台」いつでも手の届くところにいる小さな相棒として大活躍します。 

コンパクトな電気泳動&ブロッティング装置&ゲル
用途 製品コード 型式 名称 価格
電気泳動装置

WSE-1010 top_360pix.jpg

コンパクトサイズゲル(60×60mm)用の電源一体型電気泳動装置 2322240 WSE-1010 コンパクトPAGE Ace 118,000円
ブロッター

Ace_productmain.jpg

コンパクト/ミニサイズゲル1枚用の高速ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置 2322490 WSE-4115 パワードブロットAce 148,000円
ゲル

c-PAGEL HR-製品画像1.jpg

・最短泳動10分!コンパクトサイズの高性能ポリアクリルアミド既製ゲル(ゲルサイズ60×60mm,10枚/箱)
・7.5%/10%/12.5%/15%/5-20%
2331605
2331615
2331625
2331635など
  c-PAGEL HR 22,800円/箱
ゲル作製器

WSE-1090 top_360pix.jpg

簡単にセッティングでき、最大4枚までコンパクトサイズゲル(幅60mm×高さ60mm)を作製可能 2393625 WSE-1090 

多連コンパクトゲル
作製器 

46,800円
その他のオススメ
用途 製品コード 型式 名称 価格
装置

2M_productmain.jpg

コンパクトサイズゲル3枚まで同時ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置(ミニサイズゲルは2枚同時可能) 2322496 WSE-4125 パワードブロット 2M 218,000円
試薬

QBlot-kit-C_productmain.jpg

セミドライブロッティング用トランスファーパック
(コンパクトサイズゲル10枚分)
2322447 WSE-4056 QBlot Kit C 19,800円
データ例1:既製ゲルc-PAGEL HR を用いたTris-Glycine 系SDS-PAGE

コンパクト② のコピー.png

上図は、既製ゲルを電気泳動装置コンパクトPAGE Ace(WSE-1010)を使用して、スタンダードモード(上、21mA/gel)およびハイモード(下、24W c.w.)で電気泳動した結果を示しています。
高速泳動した場合でもスマイリング等のバンドの乱れは確認されず、スタンダードモード(定電流)で泳動したゲルと同じように良好な泳動パターンを得ることができます。

データ例2:自作ゲルおよびミニサイズゲルとの比較

コンパクト① のコピー.png

上図は12.5%のLaemmli法に準拠したコンパクトサイズの自作ゲル、CHR-T12.5LEHR-T12.5Lの既製ゲルを使用して泳動したパターンを示しています。
c・パジェル HRは自作ゲルと同等のバンドの移動度および泳動パターンを示します。
また60×60mmのコンパクトサイズでも、ミニサイズゲル(85x90 mm)と同様に、はっきりとしたバンドが確認できます。
このような分離が安定的に再現性良く得られるのが既製ゲルの強みです。

データ例3:DNAの電気泳動

コンパクト⓷-2 のコピー.png

上図はCHR-520Lの既製ゲルと1.2%アガロースゲル/TAE(120×120 mm) を使用してDNAの分子量マーカー(100bpラダー)などを泳動し、EzFluoroStain DNAで染色、検出したパターンを示しています。ゲル内の四角で囲った部分が同じ大きさのバンド位置に相当します。
1 kbp以上のバンド(赤四角)の分離に関してはアガロースゲルの方が良好ですが、1 kbp以下のバンド(黄または青四角)は逆にアクリルアミドゲルの方がシャープに分離されることが判ります。
c・パジェル HRはコンパクトサイズ(60×60mm)なので短時間で分離できるうえに、ミニゲルサイズ同様の分離パターンが得られ、バンドが明瞭に検出できます。

一度にたくさん検出したい

一度に60検体(30検体/ワイドゲル)が同じ泳動条件で検出できるため、作業効率が格段にアップ!
さらに泳動時間は最短30分、ブロッティング時間は最短10分と短く、実験の時短が可能となります。
同一ゲルで多検体を検出したい方や、スクリーニングを行う方に特にオススメです。

ハイスループット 電気泳動&ブロッティング装置&ゲル
用途 製品コード 型式 名称 価格
電気泳動槽

WSE-1170 top_360pix.jpg

ワイドサイズゲル(140mm幅)が2枚まで泳動可能な電気泳動槽 2322210 WSE-1170 マルチレーンゲル
電気泳動槽
92,000円
電源装置

PowerStation-Ghibli-I_productmain.jpg

・タッチパネル式電源装置
・高速電気泳動・高速ブロッティングにも対応
・電圧:0~500V(max.200W)
・電流:0~3000mA (max.200W)
2311130 WSE-3100 パワーステーション
ギブリⅠ
248,000円
ブロッター

4M_productmain.jpg

・ワイドサイズゲル2枚まで同時ブロッティング可能
(ミニサイズゲルは4枚同時に転写可能)
・セミドライブロッティング装置
2322476 WSE-4045 ホライズブロット4M 168,000円
ゲル

M520L.png

・ワイドサイズのポリアクリルアミド既製ゲル
・ゲルサイズ140×85mm, 6枚/箱
・5-20%濃度/30検体
・1台の泳動槽で同条件で60検体泳動可能
2332240 M-520L m-PAGEL 18,800円/箱
ゲル作製器

WSE-1195 top_360pix.jpg

・簡単セッティング
・最大4枚までワイドサイズゲル(幅140mm×高さ80mm)を作製可能
2393032 WSE-1195  マルチレーンゲル作製器 65,000円
その他のオススメ
用途 製品コード 型式 名称 価格
ブロッター

2M_productmain.jpg

・ワイドサイズゲル1枚がブロッティング可能
・セミドライブロッティング装置
(ミニサイズゲルは2枚同時に転写可能)
2322466 WSE-4025 ホライズブロット2M 128,000円
試薬

WSE-4058_製品画像①.jpg

セミドライブロッティング用トランスファーパック
(ワイドサイズゲル6枚分)
2322447 WSE-4058 QBlot Kit W 19,800円
データ例1:既製ゲルm-PAGELを用いたTris-Glycine 系SDS-PAGE

データ例_ワイド.jpg

上図は、既製ゲルm-PAGEL (5-20%)を電気泳動装置マルチレーンゲル電気泳動槽(WSE-1170)を使用して、300V定電圧で35分間電気泳動した結果を示しています。
すべてのレーンで、スマイリング等のバンドの乱れは確認されず、非常にシャープできれいな泳動パターンが得られることが確認できます。
1枚のゲルで一気に30検体、1台の泳動槽に2枚のゲルをセットすれば同時に60検体の検出が可能です。

データ例2:タンパク質の発現クローンを迅速にチェック

多検体① のコピー.png

上図は、大腸菌発現系によりタンパク質を発現させたクローンをEzBactYeast Crusherで溶解し、抽出したタンパク質をEzLabelFluoroNeoで処理し、既製ゲルm-PAGEL (5-20%)を結果を示しています。
EzLabelFluoroNeoは泳動サンプルの調製と同時に蛍光標識される上に、泳動後のゲルの染色・脱色の手間がないため、60検体のサンプルのクローンチェックが約1時間で終了します。

データ例3:多検体のウェスタンブロッティング

多検体② のコピー.png

上図は、様々なサンプルを同時に同じ条件で転写~ブロッキング~抗体反応を行って、ターゲットタンパク質を検出した結果を示しています。
既製ゲルm-PAGEL (5-20%)を使用すれば、60検体(30検体/ゲル)を一度に電気泳動で分離して、ウェスタンブロッティングができます。
さらにQBlot kit Wを使用すれば、大きなゲルでも転写ムラや気泡抜けのような心配もなく、再現性の高い実験が可能です。

オススメの試薬

試薬の調製やゲルの作製が面倒、時間がもったいない、失敗したくないという人にオススメです!
高品質の試薬で、再現性良く、かんたんに、きれいなデータを残せます。
ここに掲載されていない試薬もたくさんありますので、ぜひごお試しください。

アトーのオススメ試薬ラインナップ
用途 製品コード 型式 名称 価格
電気泳動用

AE-1430.png

タンパク質のSDS-PAGE用のサンプル調製用の試薬キット 2332330 AE-1430 EzApply
イージーアプライ
9,800円

WSE-7015 EzStandard Ⅱ.jpg

220~14.3kDa/7本のバンドからなるスタンダードなタンパク質マーカー 2332341 WSE-7015 EzStandard Ⅱ
イージースタンダードⅡ
14,800円

AE-1410 -2.png

・標準的なSDS-PAGE用電気泳動バッファー
・10Lのバッファーが調製できる粉末タイプ
2332310 AE-1410 EzRun
イージーラン
6,800円

AE-1340.png

・酢酸、アルコールを含まないタンパク質検出用のCBB染色液
・脱色は水でOK!
2332370 AE-1340 EzStainAQua
イージーステインアクア
12,800円
ウェスタンブロッティング
(転写)

EzFastBlot_productmain(240205)x.jpg

・セミドライブロッティング用転写バッファー
・5~15分で高効率に転写できる高速ブロッティング試薬
2332590 AE-1465  EzFastBlot
イージーファストブロット
12,800円

20-20-cm_productmain.jpg

・ミニサイズゲルにカットされたブロッティング用ろ紙
・厚さ:0.9mm サイズ:8.5×9.0cm(400枚入) 
※その他のサイズもあります
2392393 CB-09A  ろ紙 24,800円

P-__productmain(240129).jpg

・ミニゲルサイズにカットされたブロッティング用PVDF膜
・サイズ:85×90mm  20枚/箱
※その他のサイズ、低蛍光用もあります
2322451 WSE-4051  クリアブロット・Pプラス膜  20,800円

WSE-4057_製品画像①.jpg

・ミニサイズゲル用のすぐに使えるプレウエットPVDF膜&シート 
・転写バッファー、ろ紙、PVDF膜は不要
・10組/箱
※その他のサイズもあります
2322443 WSE-4057 QBlot kit M
キューブロットキット M
19,800円
ウェスタンブロッティング
(ブロッキング)

20230227_AE-1475_EzBlock_Chemi.jpg

・非タンパク質系ブロッキング剤
・10×濃度 500 mL
※蒸留水で希釈して使用します
2332615 AE-1475 EzBlock Chemi 
イージーブロックケミ
12,800円
ウェスタンブロッティング
(洗浄など)

20230303_WSE-7230_EzTBS(1L).jpg

・ウェスタンブロッティングや免疫染色の際に使用するTBSバッファー洗浄溶液
・10×濃度 1000 mL
※蒸留水で希釈して使用します
2332625 WSE-7230 EzTBS
イージーティービーエス
7,800円

20230228_WSE-7235_EzTween.jpg

・界面活性剤 10%Tween溶液
・100×濃度(終濃度 0.1%) 100 mL
2332626 WSE-7235 EzTween
イージートゥイーン
3,800円
ウェスタンブロッティング
(検出)

EzWestBlue-W_productmain.jpg

・HRP(西洋ワサビペルオキシダーゼ)検出用のTMB発色基質
・pg中域まで検出可能
・200 mL
2332456 WSE-7140 EzWestBlueW
イージーウエストブルーW
15,800円

20230301_WSE-7120 EzWestLumiPlus_S2.jpg

・HRP(西洋ワサビぺルオキシターゼ)検出用の2液からなる高感度ルミノール系発光基質
・fg高域まで検出可能
・50 mL×2本
2332637 WSE-7120S  EzWestLumi plus
イージーウェストルミプラス
12,800円
さらにプラス!解析の幅が広がる試薬
用途 製品コード 型式 名称 価格
電気泳動用

WSE-7010.png

電気泳動の試料調製と同時にタンパク質を蛍光標識する試薬キット 2332333 WSE-7010 EzLabelFluoroNeo
イージーラベルフロロネオ
33,800円

WSE-7020 EzProteinLadder.jpg

245~5kDa/13本のバンドのプレステイン(カラー)タンパク質マーカー 2332346 WSE-7020 EzProtin Ladder
イージープロテインラダー
25,800円

WSE-7065.png

・SDS-PAGE用のMOPS系泳動バッファー
・高速電気泳動、広範囲な分子量域の分離が可能
・25×濃度 250 mL
2332326 WSE-7065 EzRunMOPS
イージーランモップス
8,800円
ウェスタンブロッティング
(ストリッピング)

EzFastBlot-HMW_productmain(240206).jpg

・高分子量タンパク質(200kDa以上)も高速ブロッティングが可能
・セミドライブロッティング用バッファー
2332595 WSE-7210 EzFastBlot HMW
イージーファストブロットHMW
12,800円

EzWestLumi-One_productmain(240131) jpg.jpg

・1液タイプのHRP(西洋ワサビぺルオキシターゼ)検出用の高感度ルミノール系発光基質
・pg低域まで検出可能
・250 mL
2332632 WSE-7110  EzWestLumiOne
イージーウェストルミワン
13,800円

20230303_WSE-7240_EzReprobe+e.jpg

高性能ストリッピング試薬(ウエスタンブロット抗体剥離剤) 2332530 WSE-7240 EzReprobe
イージーリプローブ
15,800円
データ例1:サンプル調製における還元剤の影響

試薬① のコピー.png

上図は、トリ筋肉およびヒト血漿タンパク質をEzApply(還元用DTT付属)で抽出し、電気泳動サンプルを調製して電気泳動をした結果です。
トリ筋肉はePAGEL (E-T520L)で、ヒト血漿タンパク質はePAGEL (E-T7.5L)で分離し、泳動後のゲルはEzStainAQuaで染色しました。
また抽出する際に、β⁻メルカプトエタノール(β⁻Me)を使用した場合(ゲルの左サイド)とDTTを使用した場合(ゲルの右サイド)を比較しました。
還元剤の違いにより、バンドの形状やパターンが若干異なることが判ります。
各レーンの上部に表示された数字は、電気泳動サンプル調製後に凍結融解を繰り返した回数を示しています。

データ例2:泳動バッファーの影響

試薬④ のコピー.png

分子量マーカータンパク質を10%および5-20%のアクリルアミド濃度のポリアクリルアミドゲルを使用し、EzRunEzRunMOPSで電気泳動した結果です。
10%均一濃度ゲルが泳動バッファーを変えるだけで、5-20%濃度勾配ゲルのような分離パターンになります。
EzRunMOPS を使用すると、低分子量側の分離範囲が広がり、より明瞭に分離できるようになります。

データ例3:CBB染色方法の比較

試薬② のコピー.png

ヒトトランスフェリンタンパク質を400ng/レーンからの1/2希釈系列で泳動し、EzStainAQuaおよび一般的なCBB染色でゲルを染色した結果を示しています。
EzStainAQuaは電子レンジを使用すると、約10分でバンドが確認できるようになり、一晩染色してもバンド以外の部分が染色されないため、脱色なしでバンドを確認できます。
さらに脱色後は一般的なCBB染色法の検出限界が25ng/レーンなのに対し、その約1/4の6.2ng/レーンまで検出することができます。
EzStainAQuaは、かんたんに、すばやく、さらに感度よくバンドを検出でき、メタノールや酢酸を含まない環境にも優しいCBB染色液です。

データ例4:転写方法の比較

試薬⓷ のコピー.png

ヒトトランスフェリンの希釈系列を電気泳動し、QBlot kitEzBlotEzFastBlotEzFastBlot HMWを使用して転写しました。各試薬の下に記載されているのは転写条件です。
EzBlock CASでブロッキング後、ヒトトランスフェリン抗体、続いてHRP標識二次抗体と反応し、EzWestLumi plusを使用して検出した結果を示しています。
転写に使用する転写バッファーにより、転写の時間や転写効率が異なり、結果が影響されることが判ります。

データ例5:ブロッキング溶液とブロッキング時間の影響

試薬⑤ のコピー.png

上図は様々なブロッキング溶液を使用した場合の影響とブロッキング時間の影響を調べた結果を示しています。ブロッキング試薬により、検出感度やバックグランドの影響が異なることが判ります。
またブロッキング時間が長くなると、バックグランドが低減されていきますが、バンドのシグナル強度も徐々に変わることが判ります。
特に左端のバンドはブロッキングが短くても(5分)長くても(30分)、真ん中の10分のものと比較すると検出感度が若干低くなります。
検出するターゲットタンパク質の発現量やサンプルの種類、また抗体の抗体価に応じて適切なブロッキング剤を選択し、ブロッキング時間を検討することが重要です。

データ例6:HRP検出試薬の比較

試薬⑥ のコピー.png

上図は検出試薬による検出感度の違いを示しています。発光検出は発色検出と比較すると検出感度が高いことが判ります。
発光検出の場合は撮影装置や露光時間により検出感度が影響されるため、さらに高感度に検出することも可能になります。

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