テクニカルインフォメーション
SDS-PAGEとウエスタンブロッティングのセレクションガイド
アトー定番 スタンダードセレクション
機能性・操作性ばつぐん!
アトーを代表する一番人気の電気泳動槽とブロッティング装置、電源装置です。
リーズナブルな価格で応用範囲も広く、これから始める人からスペシャリストまでオススメできます。
アトー定番の電気泳動&ブロッティング装置&ゲル
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
電気泳動槽 | ・標準的ミニサイズゲル用の電気泳動槽 ・同時にミニサイズゲル2枚泳動可能 ・ゲルサイズ 8x9cm ※プレキャストゲル用(P)と自作ゲル用(M)の2種類があります |
2321900 2321905 |
AE-6530M AE-6530P |
ラピダス ミニスラブ電気泳動槽 | 52,800円 | |
電源 | ・アトー No1の人気者 ・電源装置 小型・軽量タイプ ・電圧:1~300V(max.50W) ・電流:1~400mA(max.50W) |
2311175 | AE-8135 | マイパワーⅡ 300 | 92,800円 | |
ブロッター | ・ミニサイズゲル2枚まで同時ブロッティング可能 ・セミドライブロッティング装置 |
2322466 | WSE-4025 | ホライズブロット2M | 128,000円 | |
ゲル | ・標準ミニサイズサイズ(90×83mm)のポリアクリルアミド既製ゲル ・高速泳動対応 300V定電圧で35分 ・7.5%/10%/12.5%/15%/5-20%/10-20% |
2331970 2331950 2331955 2331960 など |
e-PAGEL HR | 18,800円/箱 | ||
作製器 | ・ミニサイズゲル作製キット ・ゲルサイズ90×85mm ・ゲル厚1mm用(ゲル2枚分) |
2393010 | AE-6401 | ミニスラブゲル作製キット | 28,800円 |
その他のオススメ
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
ブロッター | ミニサイズゲル2枚まで同時ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置 | 2322496 | WSE-4125 | パワードブロット 2M | 218,000円 | |
試薬 | セミドライブロッティング用トランスファーパック (ミニゲル10枚分) |
2322443 | WSE-4057 | QBlot Kit M キューブロットキットM |
19,800円 |
データ例1:ゲルの違いと泳動パターンの比較
上図は一般的な自作ゲル(Laemmli 5-20% gel, 375 mM Tris/pH8.8ゲル緩衝液使用)、プレキャストゲルのe-PAGEL HR (EHR-T520L)とe-PAGEL(E-T520L)を使用して、分子量マーカー (EzProtein Ladder, EzStandard)、ニワトリ筋抽出液、ヒト血漿タンパク質をEzRun(Tris/Gly/SDSバッファー)で泳動したパターンを示しています。
e-PAGEL HRはLaemmli法に準拠した自作ゲルやe-PAGELの約半分の時間で、泳動パターンやバンド移動度を保持したままで、より明瞭に分離できるようになります。
データ例2:高速電気泳動の影響
上図は 高濃度(15%アクリルアミド)のプレキャストゲルのe-PAGEL HR (EHR-T15L)とe-PAGEL(E-T15L)を使用して、ヒト血漿タンパク質、ニワトリ筋抽出液、分子量マーカーなどを電気泳動したパターンを示しています。
e-PAGELは高電圧条件で泳動するとスマイリングします(中央)が、e-PAGEL HRは高濃度ゲルでも高電圧(300V)条件下で、スマイリングすることなく、良好にバンドが分離できることが判ります(左)。
データ例3:転写効率の比較
上図は e-PAGEL HR (EHR-T520L)および他社製の既製ゲルを使用して、ヒト血漿タンパク質、ニワトリ筋抽出液、分子量マーカーなどを電気泳動で分離した後に、EzFastBlotまたはトランスファーパックで転写した結果を示しています。
左は転写した膜をEzStain AQuaMEMで染色した結果で、右は転写後のゲルをEzStain AQuaで染色した結果であり、他社製品と同等以上の転写効率が確認されました。
ゲルにほとんどバンドが残存していないことから、EzFastBlotの転写効率が高いだけではなく、e-PAGEL HRが転写にも適したゲルであることが判ります。
安価で新規導入にオススメ
これから始める人でも簡単に電気泳動とブロッティングが始められるお手頃価格の装置や試薬をご紹介します。
ボタン一つのシンプル操作で電気泳動もブロッティングもスタートできます。
実験の初期費用を抑えたい、試しに電気泳動やウエスタンブロッティングをしてみたい方に特にオススメです。
シンプル操作の電気泳動・ブロッティング・ゲル
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
電気泳動装置 | ・標準的ミニサイズゲル用の電気泳動槽 ・同時にミニサイズゲル2枚泳動可能 ・ゲルサイズ 8x9cm ※プレキャストゲル用(P)と自作ゲル用(M)の2種類があります |
2321670 2321650 |
WSE-1150P WSE-1150M |
パジェランAce | 128,000円 | |
ブロッター | ミニ/コンパクトサイズゲル1枚用の高速ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置 | 2322490 | WSE-4115 | パワードブロットAce | 148,000円 | |
ゲル | ・標準ミニサイズサイズ(90×83mm)のポリアクリルアミド既製ゲル ・アトーで最も安価な既製ゲルです ・7.5%/10%/12.5%/15%/5-20%/10-20% |
2331830 2331800 2331810 2331820 など |
e-PAGEL | 15,800円/箱 | ||
作製器 | ・ミニサイズゲル作製キット ・ゲルサイズ90×85mm ・ゲル厚1mm用 (ゲル2枚分) |
2393010 | AE-6401 | ミニスラブゲル作製キット | 28,800円 |
その他のオススメ
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
電源 | ・アトー No1の人気者 ・電源装置 小型・軽量タイプ ・電圧:1~300V(max.50W) ・電流:1~400mA (max.50W) |
2311175 | AE-8135 | マイパワーⅡ 300 | 92,800円 | |
試薬 | セミドライブロッティング用トランスファーパック (ミニサイズゲル10枚分) |
2322443 | WSE-4057 | QBlot Kit M キューブロットキットM |
19,800円 |
データ例1:アクリルアミド濃度と泳動パターン
上図はヒト血漿タンパク質、ニワトリ筋抽出液、分子量マーカーなどをアクリルアミド濃度のe-PAGELを使用し、EzRun で電気泳動した結果です。
バンドの分子がシャープで、良好に分離されることが判ります。
データ例2:AE-1465 EzFastBlot を用いたウエスタンブロッティング
上図は e-PAGEL (E-T520L)を使用して、ヒト血漿タンパク質、ニワトリ筋抽出液、分子量マーカーなどを電気泳動で分離した後に、EzFastBlotで転写した結果を示しています。
左は転写した膜をEzStain AQuaMEMで染色した結果で、右は転写後のゲルをEzStain AQuaで染色した結果です。
ゲルにほとんどバンドが残存していないことから、EzFastBlotにより高効率で転写されたことが判ります。
安価で新規導入にオススメ
アトーの技術の最高峰!多機能・高性能・拡張性の高いハイエンドプロダクトです。
安全性も抜群の高速泳動にも高速ブロッティングにも対応したタッチパネル電源をはじめ、アトー推奨の装置をご紹介します。
電気泳動とウエスタンブロッティングの効率と性能にこだわりのある方に特にオススメです。
最上級の電気泳動&ブロッティング装置&ゲル
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
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電気泳動槽 | ・アクリル製ミニサイズゲル用の電気泳動槽 ・同時にミニサイズゲル2枚泳動可能 ・ゲルサイズ 8x9cm |
2322197 | WSE-1165 | ラピダス ミニスラブ | 88,000円 | |
電源 | ・タッチパネル式電源装置 ・高速電気泳動・高速ブロッティングにも対応 ・電圧:0~500V(max.200W) ・電流:0~3000mA (max.200W) |
2311130 | WSE-3100 | PowerStation Ghibli I | 248,000円 | |
ブロッター | ・ミニサイズゲル4枚まで同時ブロッティング可能 ・セミドライブロッティング装置 |
2322476 | WSE-4045 | ホライズブロット4M | 168,000円 | |
ゲル | ・新規架橋剤使用ミニサイズゲル(90×83mm)のポリアクリルアミド既製ゲル ・高分子タンパク質・Native-PAGEに最適 ・高速泳動にも対応 ・300V定電圧で35分 ・5%/3-10%/3-14%/4-20% |
2331300 2331302 2331306 2331304 など |
u-PAGEL H | 25,800円/箱 | ||
作製器 | ミニサイズゲル作製キット ゲルサイズ90×85mm ゲル厚1mm用(ゲル2枚分) |
2393010 | AE-6401 | ミニスラブゲル作製キット | 28,800円 |
その他のオススメ
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
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ブロッター | ミニサイズゲル2枚まで同時ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置 | 2322466 | WSE-4025 | ホライズブロット2M | 128,000円 | |
試薬 | 高分子量タンパク質(200kDa以上)にも適したセミドライブロッティング用バッファー(ミニゲル10枚分) | 2332595 | WSE-7210 | EzFastBlot HMW | 12,800円 |
データ例1:u-PAGEL Hと泳動パターン
上図はu-PAGEL Hを使用して分子量マーカー、ニワトリ筋抽出液、HeLa細胞抽出液、コラーゲンなどをEzRun で電気泳動した結果です。
200kDa以上の高分子量タンパク質のバンドの分子がシャープで、良好に分離されることが判ります。
データ例2:高分子コラーゲンバンドの分離パターン
左図は u-PAGEL Hを使用して、コラーゲンを分離した結果を示しています。他社のゲルと比較して、u-PAGEL Hは高分子のバンドがスメアになることなく、短時間で明瞭に分離されることが判ります。
【泳動条件】
u-PAGEL H:300V c.v., 30~45分
他社ゲル:150V c.v., 61分
データ例3:高分子タンパク質のウエスタンブロッティング
左図は大腸がん由来細胞株の抽出液を分離し、それぞれの抗体でウェスタンブロッティングを行った結果を示しています。u-PAGEL Hは600kDa以上のタンパク質を良好に分離できるだけではなく、ポアサイズが均一で大きいことから、セミドライブロッティングでも高効率に転写することができます。
【サンプル】
左からColo205, HCT116, SW620, HeLa, HepG2細胞抽出液
【転写条件】
EzFastBlot HMW:24V c.v., 30分
【検出】
EzWestLumiOne
LuminoGraphⅢ系撮影装置
データ例4:Native-PAGEによる解析にも最適
上図は様々なNative-PAGE法で分離した結果を示しています。 |
|
短時間で実験したい
ゲルサイズが60×60mmの小さいサイズなので、電気泳動もブロッティングも最短各10分で済ませることができます。
短時間で手早く実験をしたい方にオススメです。
さらに装置が手のひらサイズで、実験台の上でも場所を取らないので「1人1台」「各実験台に1台」いつでも手の届くところにいる小さな相棒として大活躍します。
コンパクトな電気泳動&ブロッティング装置&ゲル
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
電気泳動装置 | コンパクトサイズゲル(60×60mm)用の電源一体型電気泳動装置 | 2322240 | WSE-1010 | コンパクトPAGE Ace | 118,000円 | |
ブロッター | コンパクト/ミニサイズゲル1枚用の高速ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置 | 2322490 | WSE-4115 | パワードブロットAce | 148,000円 | |
ゲル | ・最短泳動10分!コンパクトサイズの高性能ポリアクリルアミド既製ゲル(ゲルサイズ60×60mm,10枚/箱) ・7.5%/10%/12.5%/15%/5-20% |
2331605 2331615 2331625 2331635など |
c-PAGEL HR | 22,800円/箱 | ||
ゲル作製器 | 簡単にセッティングでき、最大4枚までコンパクトサイズゲル(幅60mm×高さ60mm)を作製可能 | 2393625 | WSE-1090 | 46,800円 |
その他のオススメ
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
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装置 | コンパクトサイズゲル3枚まで同時ブロッティング可能な電源付セミドライブロッティング装置(ミニサイズゲルは2枚同時可能) | 2322496 | WSE-4125 | パワードブロット 2M | 218,000円 | |
試薬 | セミドライブロッティング用トランスファーパック (コンパクトサイズゲル10枚分) |
2322447 | WSE-4056 | QBlot Kit C | 19,800円 |
データ例1:既製ゲルc-PAGEL HR を用いたTris-Glycine 系SDS-PAGE
上図は、既製ゲルを電気泳動装置コンパクトPAGE Ace(WSE-1010)を使用して、スタンダードモード(上、21mA/gel)およびハイモード(下、24W c.w.)で電気泳動した結果を示しています。
高速泳動した場合でもスマイリング等のバンドの乱れは確認されず、スタンダードモード(定電流)で泳動したゲルと同じように良好な泳動パターンを得ることができます。
データ例2:自作ゲルおよびミニサイズゲルとの比較
上図は12.5%のLaemmli法に準拠したコンパクトサイズの自作ゲル、CHR-T12.5L、EHR-T12.5Lの既製ゲルを使用して泳動したパターンを示しています。
c・パジェル HRは自作ゲルと同等のバンドの移動度および泳動パターンを示します。
また60×60mmのコンパクトサイズでも、ミニサイズゲル(85x90 mm)と同様に、はっきりとしたバンドが確認できます。
このような分離が安定的に再現性良く得られるのが既製ゲルの強みです。
データ例3:DNAの電気泳動
上図はCHR-520Lの既製ゲルと1.2%アガロースゲル/TAE(120×120 mm) を使用してDNAの分子量マーカー(100bpラダー)などを泳動し、EzFluoroStain DNAで染色、検出したパターンを示しています。ゲル内の四角で囲った部分が同じ大きさのバンド位置に相当します。
1 kbp以上のバンド(赤四角)の分離に関してはアガロースゲルの方が良好ですが、1 kbp以下のバンド(黄または青四角)は逆にアクリルアミドゲルの方がシャープに分離されることが判ります。
c・パジェル HRはコンパクトサイズ(60×60mm)なので短時間で分離できるうえに、ミニゲルサイズ同様の分離パターンが得られ、バンドが明瞭に検出できます。
一度にたくさん検出したい
一度に60検体(30検体/ワイドゲル)が同じ泳動条件で検出できるため、作業効率が格段にアップ!
さらに泳動時間は最短30分、ブロッティング時間は最短10分と短く、実験の時短が可能となります。
同一ゲルで多検体を検出したい方や、スクリーニングを行う方に特にオススメです。
ハイスループット 電気泳動&ブロッティング装置&ゲル
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
電気泳動槽 | ワイドサイズゲル(140mm幅)が2枚まで泳動可能な電気泳動槽 | 2322210 | WSE-1170 | マルチレーンゲル 電気泳動槽 |
92,000円 | |
電源装置 | ・タッチパネル式電源装置 ・高速電気泳動・高速ブロッティングにも対応 ・電圧:0~500V(max.200W) ・電流:0~3000mA (max.200W) |
2311130 | WSE-3100 | パワーステーション ギブリⅠ |
248,000円 | |
ブロッター | ・ワイドサイズゲル2枚まで同時ブロッティング可能 (ミニサイズゲルは4枚同時に転写可能) ・セミドライブロッティング装置 |
2322476 | WSE-4045 | ホライズブロット4M | 168,000円 | |
ゲル | ・ワイドサイズのポリアクリルアミド既製ゲル ・ゲルサイズ140×85mm, 6枚/箱 ・5-20%濃度/30検体 ・1台の泳動槽で同条件で60検体泳動可能 |
2332240 | M-520L | m-PAGEL | 18,800円/箱 | |
ゲル作製器 | ・簡単セッティング ・最大4枚までワイドサイズゲル(幅140mm×高さ80mm)を作製可能 |
2393032 | WSE-1195 | マルチレーンゲル作製器 | 65,000円 |
その他のオススメ
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
ブロッター | ・ワイドサイズゲル1枚がブロッティング可能 ・セミドライブロッティング装置 (ミニサイズゲルは2枚同時に転写可能) |
2322466 | WSE-4025 | ホライズブロット2M | 128,000円 | |
試薬 | セミドライブロッティング用トランスファーパック (ワイドサイズゲル6枚分) |
2322447 | WSE-4058 | QBlot Kit W | 19,800円 |
データ例1:既製ゲルm-PAGELを用いたTris-Glycine 系SDS-PAGE
上図は、既製ゲルm-PAGEL (5-20%)を電気泳動装置マルチレーンゲル電気泳動槽(WSE-1170)を使用して、300V定電圧で35分間電気泳動した結果を示しています。
すべてのレーンで、スマイリング等のバンドの乱れは確認されず、非常にシャープできれいな泳動パターンが得られることが確認できます。
1枚のゲルで一気に30検体、1台の泳動槽に2枚のゲルをセットすれば同時に60検体の検出が可能です。
データ例2:タンパク質の発現クローンを迅速にチェック
上図は、大腸菌発現系によりタンパク質を発現させたクローンをEzBactYeast Crusherで溶解し、抽出したタンパク質をEzLabelFluoroNeoで処理し、既製ゲルm-PAGEL (5-20%)を結果を示しています。
EzLabelFluoroNeoは泳動サンプルの調製と同時に蛍光標識される上に、泳動後のゲルの染色・脱色の手間がないため、60検体のサンプルのクローンチェックが約1時間で終了します。
データ例3:多検体のウェスタンブロッティング
上図は、様々なサンプルを同時に同じ条件で転写~ブロッキング~抗体反応を行って、ターゲットタンパク質を検出した結果を示しています。
既製ゲルm-PAGEL (5-20%)を使用すれば、60検体(30検体/ゲル)を一度に電気泳動で分離して、ウェスタンブロッティングができます。
さらにQBlot kit Wを使用すれば、大きなゲルでも転写ムラや気泡抜けのような心配もなく、再現性の高い実験が可能です。
オススメの試薬
試薬の調製やゲルの作製が面倒、時間がもったいない、失敗したくないという人にオススメです!
高品質の試薬で、再現性良く、かんたんに、きれいなデータを残せます。
ここに掲載されていない試薬もたくさんありますので、ぜひごお試しください。
アトーのオススメ試薬ラインナップ
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
電気泳動用 | タンパク質のSDS-PAGE用のサンプル調製用の試薬キット | 2332330 | AE-1430 | EzApply イージーアプライ |
9,800円 | |
220~14.3kDa/7本のバンドからなるスタンダードなタンパク質マーカー | 2332341 | WSE-7015 | EzStandard Ⅱ イージースタンダードⅡ |
14,800円 | ||
・標準的なSDS-PAGE用電気泳動バッファー ・10Lのバッファーが調製できる粉末タイプ |
2332310 | AE-1410 | EzRun イージーラン |
6,800円 | ||
・酢酸、アルコールを含まないタンパク質検出用のCBB染色液 ・脱色は水でOK! |
2332370 | AE-1340 | EzStainAQua イージーステインアクア |
12,800円 | ||
ウェスタンブロッティング (転写) |
・セミドライブロッティング用転写バッファー ・5~15分で高効率に転写できる高速ブロッティング試薬 |
2332590 | AE-1465 | EzFastBlot イージーファストブロット |
12,800円 | |
・ミニサイズゲルにカットされたブロッティング用ろ紙 ・厚さ:0.9mm サイズ:8.5×9.0cm(400枚入) ※その他のサイズもあります |
2392393 | CB-09A | ろ紙 | 24,800円 | ||
・ミニゲルサイズにカットされたブロッティング用PVDF膜 ・サイズ:85×90mm 20枚/箱 ※その他のサイズ、低蛍光用もあります |
2322451 | WSE-4051 | クリアブロット・Pプラス膜 | 20,800円 | ||
・ミニサイズゲル用のすぐに使えるプレウエットPVDF膜&シート ・転写バッファー、ろ紙、PVDF膜は不要 ・10組/箱 ※その他のサイズもあります |
2322443 | WSE-4057 | QBlot kit M キューブロットキット M |
19,800円 | ||
ウェスタンブロッティング (ブロッキング) |
・非タンパク質系ブロッキング剤 ・10×濃度 500 mL ※蒸留水で希釈して使用します |
2332615 | AE-1475 | EzBlock Chemi イージーブロックケミ |
12,800円 | |
ウェスタンブロッティング (洗浄など) |
・ウェスタンブロッティングや免疫染色の際に使用するTBSバッファー洗浄溶液 ・10×濃度 1000 mL ※蒸留水で希釈して使用します |
2332625 | WSE-7230 | EzTBS イージーティービーエス |
7,800円 | |
・界面活性剤 10%Tween溶液 ・100×濃度(終濃度 0.1%) 100 mL |
2332626 | WSE-7235 | EzTween イージートゥイーン |
3,800円 | ||
ウェスタンブロッティング (検出) |
・HRP(西洋ワサビペルオキシダーゼ)検出用のTMB発色基質 ・pg中域まで検出可能 ・200 mL |
2332456 | WSE-7140 | EzWestBlueW イージーウエストブルーW |
15,800円 | |
・HRP(西洋ワサビぺルオキシターゼ)検出用の2液からなる高感度ルミノール系発光基質 ・fg高域まで検出可能 ・50 mL×2本 |
2332637 | WSE-7120S | EzWestLumi plus イージーウェストルミプラス |
12,800円 |
さらにプラス!解析の幅が広がる試薬
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
電気泳動用 | 電気泳動の試料調製と同時にタンパク質を蛍光標識する試薬キット | 2332333 | WSE-7010 | EzLabelFluoroNeo イージーラベルフロロネオ |
33,800円 | |
245~5kDa/13本のバンドのプレステイン(カラー)タンパク質マーカー | 2332346 | WSE-7020 | EzProtin Ladder イージープロテインラダー |
25,800円 | ||
・SDS-PAGE用のMOPS系泳動バッファー ・高速電気泳動、広範囲な分子量域の分離が可能 ・25×濃度 250 mL |
2332326 | WSE-7065 | EzRunMOPS イージーランモップス |
8,800円 | ||
ウェスタンブロッティング (ストリッピング) |
・高分子量タンパク質(200kDa以上)も高速ブロッティングが可能 ・セミドライブロッティング用バッファー |
2332595 | WSE-7210 | EzFastBlot HMW イージーファストブロットHMW |
12,800円 | |
・1液タイプのHRP(西洋ワサビぺルオキシターゼ)検出用の高感度ルミノール系発光基質 ・pg低域まで検出可能 ・250 mL |
2332632 | WSE-7110 | EzWestLumiOne イージーウェストルミワン |
13,800円 | ||
高性能ストリッピング試薬(ウエスタンブロット抗体剥離剤) | 2332530 | WSE-7240 | EzReprobe イージーリプローブ |
15,800円 |
データ例1:サンプル調製における還元剤の影響
上図は、トリ筋肉およびヒト血漿タンパク質をEzApply(還元用DTT付属)で抽出し、電気泳動サンプルを調製して電気泳動をした結果です。
トリ筋肉はePAGEL (E-T520L)で、ヒト血漿タンパク質はePAGEL (E-T7.5L)で分離し、泳動後のゲルはEzStainAQuaで染色しました。
また抽出する際に、β⁻メルカプトエタノール(β⁻Me)を使用した場合(ゲルの左サイド)とDTTを使用した場合(ゲルの右サイド)を比較しました。
還元剤の違いにより、バンドの形状やパターンが若干異なることが判ります。
各レーンの上部に表示された数字は、電気泳動サンプル調製後に凍結融解を繰り返した回数を示しています。
データ例2:泳動バッファーの影響
分子量マーカータンパク質を10%および5-20%のアクリルアミド濃度のポリアクリルアミドゲルを使用し、EzRun とEzRunMOPSで電気泳動した結果です。
10%均一濃度ゲルが泳動バッファーを変えるだけで、5-20%濃度勾配ゲルのような分離パターンになります。
EzRunMOPS を使用すると、低分子量側の分離範囲が広がり、より明瞭に分離できるようになります。
データ例3:CBB染色方法の比較
ヒトトランスフェリンタンパク質を400ng/レーンからの1/2希釈系列で泳動し、EzStainAQuaおよび一般的なCBB染色でゲルを染色した結果を示しています。
EzStainAQuaは電子レンジを使用すると、約10分でバンドが確認できるようになり、一晩染色してもバンド以外の部分が染色されないため、脱色なしでバンドを確認できます。
さらに脱色後は一般的なCBB染色法の検出限界が25ng/レーンなのに対し、その約1/4の6.2ng/レーンまで検出することができます。
EzStainAQuaは、かんたんに、すばやく、さらに感度よくバンドを検出でき、メタノールや酢酸を含まない環境にも優しいCBB染色液です。
データ例4:転写方法の比較
ヒトトランスフェリンの希釈系列を電気泳動し、QBlot kit、EzBlot、EzFastBlot、EzFastBlot HMWを使用して転写しました。各試薬の下に記載されているのは転写条件です。
EzBlock CASでブロッキング後、ヒトトランスフェリン抗体、続いてHRP標識二次抗体と反応し、EzWestLumi plusを使用して検出した結果を示しています。
転写に使用する転写バッファーにより、転写の時間や転写効率が異なり、結果が影響されることが判ります。
データ例5:ブロッキング溶液とブロッキング時間の影響
上図は様々なブロッキング溶液を使用した場合の影響とブロッキング時間の影響を調べた結果を示しています。ブロッキング試薬により、検出感度やバックグランドの影響が異なることが判ります。
またブロッキング時間が長くなると、バックグランドが低減されていきますが、バンドのシグナル強度も徐々に変わることが判ります。
特に左端のバンドはブロッキングが短くても(5分)長くても(30分)、真ん中の10分のものと比較すると検出感度が若干低くなります。
検出するターゲットタンパク質の発現量やサンプルの種類、また抗体の抗体価に応じて適切なブロッキング剤を選択し、ブロッキング時間を検討することが重要です。
データ例6:HRP検出試薬の比較
上図は検出試薬による検出感度の違いを示しています。発光検出は発色検出と比較すると検出感度が高いことが判ります。
発光検出の場合は撮影装置や露光時間により検出感度が影響されるため、さらに高感度に検出することも可能になります。
あると便利!小型汎用機器
アトーでは、実験に欠かせない小型汎用機器も取り扱っております。
使いやすくて高性能、高効率で、皆様の実験を支える縁の下の力持ちとして大活躍すること間違いなしです。
用途 | 製品コード | 型式 | 名称 | 価格 |
---|---|---|---|---|
小型ブロックインキュベータ | 4002615 | WSC-2615 | マイミニブロック C&H | 99,800円 |
小型遠心機 | 4002700 | WSC-2700 | マイミニスピン | 48,000円 |
卓上小型ボルテックスミキサー | 4002800 | WSC-2800 | マイミニボルテックス | 39,800円 |
染色・脱色用振とう装置 | 2312200 | WSC-2400 | シーソーシェーカーatto | 138,000円 |