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電気泳動
ポリアクリルアミドゲル電気泳動(PAGE)(スラブ電気泳動)
ポリアクリルアミドゲル電気泳動(スラブ電気泳動)とは
「スラブ電気泳動」とは、一般にガラスなどのプレート間に作製したゲルを垂直に立てて電気泳動する方式を言います。
主に核酸(DNA/RNA)やタンパク質のポリアクリルアミドゲルの電気泳動(Polyacrylamide Gel Electrophoresis=PAGE)に用いられます。電気泳動の中でも高い分離能を有する方法として広く用いられています。
緩衝液などに溶解した核酸(DNA/RNA)やタンパク質をポリアクリルアミドゲルに添加し、緩衝液中で一定時間電気泳動すると、サイズや分子量、荷電、立体構造などに応じた移動度を示し、結果として各々を分離することが出来ます。核酸は緩衝液中でー(マイナス)に荷電している為、直流電場では陽極に引かれて移動し、その際ゲルの分子ふるい効果により、核酸の分子量に応じた移動度を示します。タンパク質やペプチドは構成アミノ酸や溶けている緩衝液のpHによって+(プラス)にも-(マイナス)にも荷電する為、SDS*1という陰イオン性界面活性剤をタンパク質に結合させ、タンパク質を一過性に-(マイナス)に荷電させ陽極側に移動させる手法がとられます。これをSDS-PAGE*2)と言いスラブ電気泳動の代表的な手法になっています。この時タンパク質はゲルの分子ふるい効果で分子量に応じて分離することが可能となります。また、SDSを添加せず、タンパク質やペプチド固有の荷電などで泳動・分離する方法もあります(native-PAGE)。
*1 SDS:ドデシル硫酸ナトリウム(陰イオン性界面活性剤)
*2 PAGE:ポリアクリルアミドゲル電気泳動
電気泳動後の検出は試料を染色する手法が一般的です。スラブ電気泳動で分離した核酸(DNA/RNA)やタンパク質は透明で、そのままではバンドを確認することができません。そのため、分離された成分の移動度や泳動パターンの確認にはバンドの検出が必要になります。 検出方法には電気泳動前に試料(核酸やタンパク質)に標識(RI、蛍光など)をしておき、泳動・分離後それを検出する方法や、電気泳動終了後、エチジウムブロマイド(EtBr:DNA/RNAの検出)やクマシーブリリアントブルー(CBB:タンパク質の検出)などの色素染色で可視化する方法などがあります。また、ブロッティングと組み合わせることで、ゲルから膜(メンブレン)に移した成分のうち、特定の核酸やタンパク質を高感度に検出する方法もあります。こうして得られた電気泳動パターンから、試料成分の比較、分子量の推定(分子量マーカー必要)や塩基特異性・変異の検出(多型)、精製度・純度の確認、遺伝子発現産物(RNA、タンパク質)の発現量比較などの情報を得ることが可能です。
電気泳動後のバンド検出法表
染色方法 | 染色対象 | 検出方法 |
---|---|---|
エチジウムブロマイド(EtBr)染色 | 核酸 | 紫外線励起・蛍光検出 |
蛍光染色(WSE-7130 EzFluoroStain DNA) 蛍光染色(WSE-7135 EzPreStain DNA&RNA) |
核酸 | 青色LED、紫外線励起・蛍光検出 |
SYPRO Ruby/Orange染色 | タンパク質 | 紫外線励起・蛍光検出 |
蛍光標識(WSE-7010 EzLabel FluoroNeo) | タンパク質(標識) | 青色LED、紫外線励起・蛍光検出 |
クマシーブリリアントブルー(CBB)染色 (AE-1340 EzStain AQua) |
タンパク質 | 白色透過光 |
銀染色(AE-1360 EzStain Silver) | 核酸/タンパク質 | 白色透過光 |
リバース染色(AE-1310 EzStain Reverse) | タンパク質(SDS) | 黒色シート上・反射光 |
関連資料 実験のコツなど
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電気泳動後のリバース染色と 遠心ろ過によるタンパク質回収 (PDFダウンロード) |
「銀染色のコツ」 (AE-1360を用いた銀染色) (PDFダウンロード) |
実験のコツの ページ (リンク) |
泳動槽の選択基準
スラブ型電気泳動装置は目的やサンプルにあわせて「ゲルサイズ」「サンプルコウム(検体数)」などからご選択ください。さらに冷却や恒温化が必要な場合は温度コントロール可能な仕様の装置をご選択ください。
・検体(試料)数が少なかったり、時間や試薬の節約をしたい方は小さな6×6cmゲルのコンパクトPAGEシリーズをお勧めします。最短泳動時間10分です。
・現在標準的なゲルサイズが8×9cmのミニスラブシリーズをお勧めします。泳動槽や検体数(コウム)も多くのバリエーションがあります。
・多くの検体(試料)を一度に泳動したい方はマルチレーンゲルをお勧めします。ゲル2枚で最大60検体の泳動が可能です。
・もう少し大きなサイズのゲルをご希望ならラピダス・スラズ泳動槽をご利用ください。約13cm四方のゲルになります。
アトーポリアクリルアミドゲル電気泳動装置(スラブ型)
コンパクト(6×6cm)サイズ
型式 | WSE-1010 | WSE-1025 |
---|---|---|
名称 |
コンパクトPAGE Ace
|
コンパクトPAGE Ace ツイン |
適応 | 核酸、タンパク質、ポリペプチド等 | |
ゲルサイズ | 60mm(W)×60mm(L) 0.75mm厚 | |
ガラスプレートサイズ | 76mm(W)×70mm(L) | |
バッファー量 | 170mL (下部槽125mL 上部槽45mL)/ゲル1枚あたり | |
同時泳動 ゲル枚数 | 1枚 | 最大2枚 |
サンプルコウム (標準検体数) |
スマイリングレスコウム12検体 (ウェル幅2.9mm 最大アプライ量約8μL) |
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泳動用電源 | 搭載型 (Low/Stnd./High モード) | |
既製ゲル | c-PAGEL HR /cp-PAGEL |
ミニ(9×8cm)サイズ
型式 | WSE-1150 | AE-6530 | WSE-1165 |
---|---|---|---|
名称 |
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ラピダス ミニスラブ |
ラピダス ミニスラブ
|
適応 | 核酸、タンパク質、ポリペプチド 等 | ||
ゲルサイズ | 90mm(W)×80~83mm(L) 1mm厚 | ||
ガラスプレートサイズ | 120mm(W)×102mm(L) |
100~120mm(W) ×102mm(L) |
|
バッファー量 | 上部80mL 下部420mL | トータル 400~650mL | |
ゲル恒温方式 |
上下バッファーによる両面恒温 高速ハイレゾ電気泳動対応 |
||
同時泳動 ゲル枚数 | 最大2枚 | ||
サンプルコウム (標準検体数) |
スマイリングレスコウム12検体 (ゲル自作仕様) (ウェル幅4.5mm 最大アプライ量約28μL) |
||
泳動用電源 |
搭載型 (Low/Stnd./High モード) |
別途用意 | |
既製ゲル | p-PAGEL/e-PAGEL HR / e-PAGEL / u-PAGEL H |
ワイド(14×8cm、13.8×13cm)サイズ
型式 | WSE-1170 | AE-6220 |
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名称 |
マルチレーンゲル電気泳動槽
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ラピダス 二連スラブ |
適応 | 核酸、タンパク質、ポリペプチド 等 | |
ゲルサイズ | 140mm(W)×80mm(L) 1mm厚 | 138mm(W)×130mm(L) 1mm厚 |
ガラスプレートサイズ | 160mm(W)×100mm(L) | 160mm(W)×160mm(L) |
バッファー量 | 最大900mL | 最大930mL |
ゲル恒温方式 |
上下バッファーによる両面恒温 高速ハイレゾ電気泳動対応 |
上部バッファーによる片面恒温 |
同時泳動ゲル枚数 | 最大2枚 | 最大2枚 |
サンプルコウム (標準検体数) |
スマイリングレスコウム 30検体(ウェル幅3mm 最大アプライ量20μL) |
スマイリングレスコウム 12検体(ウェル幅6mm 最大アプライ量60μL) |
泳動用電源 | 別途用意 | 別途用意 |
既製ゲル | m-PAGEL | なし |
関連資料 実験のコツなど
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PAGE初めての電気泳動 タンパク質のPAGE編 (PDFダウンロード) |
「銀染色のコツ」 (AE-1360を用いた銀染色) (PDFダウンロード) |
実験のコツの ページ (リンク) |
電源装置の選択基準
スラブ電気泳動装置をご使用になるには電気泳動用の電源装置が必要となります。装置(ゲル)サイズが大きくなるに従って必要な電圧容量が大きくなりますのでご考慮ください。
また、大まかにはポリアクリルアミドゲル電気泳動は電圧(V)重視、アガロース電気泳動・ブロッティングは電流(A)重視の設定になりますのでその旨仕様を確認ください。
(〇:適用 △:条件によって適用 ×:不適用)
型式 | WSE-3100 | WSE-3200 | WSE-3500 | AE-8135 | AE-8155 | |||||
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名称 |
パワーステーションGhible I
|
パワー ステーションIII |
パワー ステーションHC |
マイパワーⅡ 300 |
マイパワーⅡ 500 |
|||||
コンパクトスラブ /ミニスラブ |
〇 | 〇 | △ | 〇 | 〇 | |||||
スラブ | 〇 | 〇 | × | 〇 | 〇 | |||||
冷却スラブ | 〇 | 〇 | × | × | △ | |||||
シークエンス | × | △ | × | × | × | |||||
等電点ディスク電気泳動 | 〇 | 〇 | × | △ | △ | |||||
等電点平板 電気泳動 | △ | △ | × | × | × | |||||
サブマリン型 アガロース | 〇 | 〇 | △ | 〇 | △ | |||||
セミドライ ブロッティング |
〇 | △ | 〇 | 〇 | △ | |||||
高速セミドライ ブロッティング |
〇 | △ | 〇 | △ | × | |||||
ウエット(タンク式) ブロッティング |
〇 | × | 〇 | × | × |
※AE-8800コンスタパワー3500は販売を終了しています。
電気泳動関連消耗品
泳動プレート(ガラスプレート)
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※ 販売終了製品 |
コンパクトスラブゲル | ゲル厚 | プレート寸法 | 型式 | 数量 | 価格 | コード | |
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図A |
WSE-1100 コンパクトPAGE Ace WSE-1125 コンパクトPAGE Ace ツイン AE-7350 コンパクトPAGE※ AE-7341 コンパクトPAGE・ツイン※ AE-7340 コンパクトスラブ電気泳動槽※ AE-7300 コンパクトPAGE※ |
0.75mm |
76mm(W) ×70mm(L) |
CAB-075 | 2枚 | ¥9,700 | 2393635 |
図C |
WSE-1100 コンパクトPAGE Ace WSE-1125 コンパクトPAGE Ace ツイン AE-7350 コンパクトPAGE※ AE-7341 コンパクトPAGE・ツイン※ AE-7340 コンパクトスラブ電気泳動槽※ AE-7300 コンパクトPAGE※ |
- |
76mm(W) ×70mm(L) |
CB-00 | 2枚 | ¥2,500 | 2393637 |
ガラスプレートの厚み(T)はベースの部分の寸法
ミニスラブゲル | ゲル厚 | プレート寸法 | 型式 | 数量 | 価格 | コード | |
---|---|---|---|---|---|---|---|
図A |
AE-6510 レゾルマックス・二連ミニスラブ AE-6407 ミニスラブ・ゲル作製キット AE-6410 レゾルマックス・二連ミニスラブ※ |
0.75mm |
120mm(W) ×102mm(L) ×3mm(T) |
MAB-075 | 2枚 | ¥12,400 | 2398228 |
図A |
AE-6530M
AE-6401 |
1mm |
120mm(W) ×102mm(L) ×3mm(T) |
MAB-10 | 2枚 | ¥10,500 | 2398230 |
図A |
WSE-1190 多連ミニスラブゲル作製器 AE-6530P ラピダス・ミニスラブ電気泳動槽 WSE-1150P パジェラン Ace AE-6531P パジェラン※ WSE-1100P パジェラン-R※ AE-6500 ラピダス・ミニスラブ電気泳動槽※ WSE-1165 ラピダス・ミニスラブ電気泳動槽 |
120mm(W) ×102mm(L) ×2mm(T) |
MAB-12 | 2枚 | ¥10,500 | 2393035 | |
図A |
AE-6500※/WSE-1165 ラピダス・ミニスラブ電気泳動槽 |
2mm |
120mm(W) ×102mm(L) ×3mm(T) |
MAB-20 | 2枚 | ¥10,500 | 2398234 |
AE-6530 ラピダス・ミニスラブ電気泳動槽 (AE-6400/6520)※ |
MAB-22 | 2398236 | |||||
図C |
AE-6530M
AE-6401 |
- |
120mm(W) ×102mm(L) ×3mm(T) |
MB-00 | 2枚 | ¥2,800 | 2398232 |
図C |
WSE-1190
WSE-1150P |
120mm(W) ×102mm(L) ×2mm(T) |
MB-02 | 2枚 | ¥2,800 | 2393036 |
スラブゲル | ゲル厚 | プレート寸法 | 型式 | 数量 | 価格 | コード | |
---|---|---|---|---|---|---|---|
図A |
AE-6290 レゾルマックス・二連スラブ※ AE-6210R スラブゲル作製キット |
0.75mm |
160mm(W) ×160mm(L) |
RAB-075 | 2枚 | ¥18,200 | 2393083 |
図A |
AE-6200 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽※ AE-6220 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽 AE-6210 ラピダス・スラブゲル作製キット |
1mm |
160mm(W) ×160mm(L) |
RAB-10 | 2枚 | ¥11,600 | 2392029 |
図A |
AE-6200 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽※ AE-6220 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽 AE-6210 ラピダス・スラブゲル作製キット |
2mm |
160mm(W) ×160mm(L) |
RAB-20 | 2枚 | ¥11,600 | 2392030 |
図C |
AE-6200 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽※ AE-6220 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽 AE-6210 ラピダス・スラブゲル作製キット AE-6290 レゾルマックス・二連スラブ※ AE-6210R スラブゲル作製キット |
- |
160mm(W) ×160mm(L) |
RB-00 | 2枚 | ¥3,700 | 2392031 |
シールガスケット
ミニスラブゲル | ゲル厚 | ガスケット寸法 | 型式 | 数量 | 価格 | コード | |
---|---|---|---|---|---|---|---|
図D |
AE-6510 レゾルマックス・二連ミニスラブ AE-6407 ミニスラブ・ゲル作製キット AE-6410 レゾルマックス・二連ミニスラブ※ |
0.75mm | 120mm(W) | RMS-01 | 3枚 | ¥5,000 | 2398237 |
図D |
AE-6530
AE-6401 |
1mm | |||||
AE-6500 ラピダス・ミニスラブ電気泳動槽※ (AE-6400/6520/6530) |
2mm |
シールチューブ φ2.5mm(外径)×5m |
- | 1本 | ¥4,800 | 2392039 |
スラブゲル | ゲル厚 | ガスケット寸法 | 型式 | 数量 | 価格 | コード | |
---|---|---|---|---|---|---|---|
図D |
AE-6290 レゾルマックス・二連スラブ※ AE-6210R スラブゲル作製キット |
0.75mm | 168mm(W) | RS-075 | 3枚 | ¥6,300 | 2393087 |
図D |
AE-6200 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽※ AE-6220 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽 AE-6210 ラピダス・スラブゲル作製キット |
1mm | 168mm(W) | RS-01 | 3枚 | ¥5,800 | 2392032 |
図D |
AE-6200 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽※ AE-6220 ラピダス・スラブゲル電気泳動槽 AE-6210 ラピダス・スラブゲル作製キット |
2mm | 168mm(W) | RS-02 | 3枚 | ¥5,800 | 2392033 |
※ 販売終了製品
泳動プレート(ガラスプレート・ガスケット)
組合せ | コンパクトスラブゲル | ゲル厚 | 型式 | 内訳 | 数量 | 価格 | コード | |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
図A+C |
コンパクトスラブゲル 泳動プレートセット (0.75mm) |
0.75mm | CP-075 | CAB-075 | 1枚 | 1組 | ¥6,100 | 2393634 |
CB-00 | 1枚 |
組合せ | ミニスラブゲル | ゲル厚 | 型式 | 内訳 | 数量 | 価格 | コード | |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
図A+C+D |
ミニスラブゲル 泳動プレートセット (0.75mm) |
0.75mm | RM-075 | MAB-075 | 1枚 | 1組 | ¥11,400 | 2393014 |
MB-00 | 1枚 | |||||||
RMS-01 | 1枚 | |||||||
図A+C+D |
ミニスラブゲル 泳動プレートセット (1mm) |
1mm | RM-10 | MAB-10 | 1枚 | 1組 | ¥8,200 | 2398214 |
MB-00 | 1枚 | |||||||
RMS-01 | 1枚 | |||||||
図A+C+D |
AE-6500用 ミニスラブゲル 泳動プレートセット (2mm) |
2mm | RM-20 | MAB-20 | 1枚 | 1組 | ¥8,200 | 2328380 |
MB-00 | 1枚 | |||||||
シールチューブ | 1本 | |||||||
図A+C+D |
AE-6520/30用 ミニスラブゲル 泳動プレートセット (2mm) |
2mm | RM-22 | MAB-22 | 1枚 | 1組 | ¥8,200 | 2393740 |
MB-00 | 1枚 | |||||||
シールチューブ | 1本 |
サンプルコウム
2D用※ はアガロースゲル用
コンパクトスラブゲル | |||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
検 体 数 | 各部寸法(mm) |
型式 /材質 |
数 量 |
価 格 | コード | ||||||||
厚 さ | A | B | C | D | E | F | G | H | |||||
12 | 0.75 | 59 | 2.9 | 1.6 | - | 52 | - | - | 6 |
CP075-12 PP成型 |
2枚 | ¥5,400 | 2393640 |
2D用 ※ |
2.5 | 57(W)×15(H) |
- アクリル |
2枚 | ¥3,000 | 2394065 |
ミニスラブゲル | |||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
検 体 数 | 各部寸法(mm) |
型式 /材質 |
数 量 |
価 格 | コード | ||||||||
厚 さ | A | B | C | D | E | F | G | H | |||||
6 | 1 | 120 | 10 | 3 | 4 | 89 | 10 | 10 | 10 |
RM10-06 テフロン |
1枚 | ¥9,000 | 2328375 |
6 | 2 | 120 | 10 | 3 | 4 | 89 | 10 | 10 | 10 |
RM20-06 テフロン |
1枚 | ¥9,000 | 2328378 |
8 | 1 | 120 | 6.5 | 3 | 5 | 89 | 10 | 10 | 10 |
RM10-08 テフロン |
1枚 | ¥9,000 | 2328376 |
8 | 2 | 120 | 6.5 | 3 | 5 | 89 | 10 | 10 | 10 |
RM20-08 テフロン |
1枚 | ¥9,000 | 2328379 |
20 | 1 | 120 | 2 | 2 | 3.5 | 89 | 10 | 10 | 10 |
RM10-20 テフロン |
1枚 | ¥9,000 | 2328422 |
12 | 0.75 | 120 | 4.5 | 2 | 4.5 | 89 | 10 | 10 | 10 |
RM075-12 テフロン |
2枚 | ¥11,800 | 2398271 |
12 | 1 | 87 | 4.4 | 2 | 4 | 87 | - | - | 10 |
RM10-12 PP成型 |
2枚 | ¥5,400 | 2398269 |
14 | 1 | 88 | 4.3 | 1.5 | 2.7 | 88 | - | - | 10 |
RM10-14 PP成型 |
2枚 | ¥5,400 | 2398224 |
18 | 1 | 87 | 2.9 | 1.6 | 1.6/2.6 | 87 | - | - | 10 |
RM10-18 PP成型 |
2枚 | ¥5,400 | 2398252 |
21 | 1 | 86 | 1.8 | 1.7 | 5.2 | 86 | - | - | 10 |
RM10-21 PP成型 |
2枚 | ¥5,400 | 2398255 |
2D用 | 2.5 | 78(W)×25(H)※ |
- アクリル |
2枚 | ¥3,000 | 2394160 | |||||||
1 | 114 | 3/78 | 2 | - | 89 | 10 | 10 | 7 |
- PE |
1枚 | ¥6,500 | 2398515 |
スラブゲル | |||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
検 体 数 | 各部寸法(mm) |
型式 /材質 |
数 量 |
価 格 | コード | ||||||||
厚 さ | A | B | C | D | E | F | G | H | |||||
8 | 1 | 156 | 11 | 4 | 6 | 136 | 10 | 20 | 15 |
RS10-08 テフロン |
1枚 | ¥8,000 | 2392060 |
8 | 2 | 156 | 11 | 4 | 6 | 136 | 10 | 20 | 15 |
RS20-08 テフロン |
1枚 | ¥8,000 | 2392063 |
12 | 0.75 | 156 | 6 | 4 | 6 | 136 | 10 | 20 | 15 |
RS075-12 テフロン |
2枚 | ¥19,000 | 2393085 |
12 | 1 | 156 | 6 | 4 | 6 | 136 | 10 | 20 | 15 |
RS10-12 テフロン |
1枚 | ¥8,000 | 2392061 |
12 | 2 | 156 | 6 | 4 | 6 | 136 | 10 | 20 | 15 |
RS20-12 テフロン |
1枚 | ¥8,000 | 2392064 |
15 | 0.75 | 156 | 5 | 3 | 6.5 | 136 | 10 | 20 | 10 |
RS075-15 テフロン |
2枚 | ¥21,000 | 2393088 |
20 | 1 | 156 | 3 | 3 | 6 | 136 | 10 | 20 | 15 |
RS10-20 テフロン |
1枚 | ¥8,000 | 2392062 |
20 | 2 | 156 | 3 | 3 | 6 | 136 | 10 | 20 | 15 |
RS20-20 テフロン |
1枚 | ¥8,000 | 2392065 |
2D用 | 2 | 156 |
3 /120 |
3 | - | 136 | 10 | 21 | 4 |
DS50-02 テフロン |
1枚 | ¥10,600 | 2392098 |