①カメラ・レンズ・フィルター

カメラ：6メガピクセル冷却CCDカメラ
レンズ：高感度 F0.8単焦点レンズ
フィルター：BPF590（バンドパス）、ND（減光フィルター）
高感度・高解像度冷却CCDカメラはケミルミや蛍光サンプルを高感度＆精細に撮影可能です。
モード選択により蛍光撮影や白色光撮影時にフィルターが自動で切り替わります。
F0.8単焦点レンズは、シャープなイメージを高感度に捉えます。

②白色光源

ムラの少ない、白色透過光源により、CBB染色ゲルや銀染色ゲルなどを6メガピクセルの高解像度イメージで撮影可能です。撮影画像は16bit TIFFで保存可能で定量解析にも適しています。

③紫外線照射装置

波長：312nmの透過型紫外線照射装置で、エチジウムブロマイドをはじめ、各種蛍光染色試薬を検出可能です。コントロールソフトでFluorescentモードを選択し撮影を開始すると蛍光撮影用フィルターが自動でセットされます。

『Marker Image』ボタンをクリックするだけで、ケミルミ撮影時にプレステイン分子量マーカー画像が自動撮影され、ケミルミ画像との合成画像を自動作成できます。

シグナルの強いサンプルを先に自動撮影した後、続けてシグナルが弱いサンプルを自動撮影します。
複数のサンプルを一緒に撮影するとき、それぞれの領域ごとに最適露光時間を計算して領域の数だけのイメージを作るため、発現量の差が大きくてもよい結果を得られます。

ターゲットのバンドのシグナルが他のノンスペシフィックなバンドなどより非常に弱い場合、一般的な自動露光では強い方のシグナルに合わせて撮影されるために検出が難しいです。エリア指定機能を使ってターゲットのバンド周辺を領域指定して撮影すれば、このような場合でも検出することができます。

ビニングとは、デジタルイメージセンサーにおける画像処理技術の一つで、画像品質や感度を調整するために使用される手法です。隣接するピクセルをグループ化し、それらのピクセル値を結合して1つのピクセル値として扱います。これにより、低シグナルは増強されてS/N比や感度の向上、画像取得スピードの短縮化といった効果が得られますが、その反面、解像度が低下するため画質も低下します。近接するバンドを検出する際などは注意する必要があります。

　　
10ng/ レーンからの1/2 希釈系列で泳動したトランスフェリンタンパク質を、抗トランスフェリン抗体でウェスタンブロッティングした結果を示しています。HRP発光基質と反応後に発光撮影イメージです。

　　
ゲル：UH-R420
サンプル：  ヒトトランスフェリン
 (10 ng/レーンからの１/２希釈系列）
転写条件：  EzFastBlot, 24V, 15分
ブロッキング：EzBlockCAS, 1時間
1次抗体：抗ヒトトランスフェリン ウサギポリクローナル抗体
2次抗体：HRP標識抗ウサギIg抗体

10ng/ レーンからの1/2 希釈系列で泳動したトランスフェリンタンパク質を、抗トランスフェリン抗体でウェスタンブロッティングした結果を示しています。HRP発光基質と反応後に発光撮影、もしくはRGB光源で励起して蛍光撮影した撮影イメージです。　　

　　
ゲル：UH-R420
サンプル： ヒトトランスフェリン (10 ng/レーンからの１/２希釈系列）
転写条件： EzFastBlot, 24V, 15分間
ブロッキング：EzBlockCAS, 30分間
1次抗体：抗ヒトトランスフェリン ウサギポリクローナル抗体
2次抗体：HRP/Alexa647/StarBright520/StarBright700 標識抗ウサギIg抗体

実験条件

ゲル：UH-T420
サンプル： HeLa細胞抽出液にトランスフェリンを添加した混合液
EzLabel FluoroNeo標識HeLa細胞抽出液 (20µg/全レーン）
Human Transferrin (左から10, 7.5, 5.0, 2.5, 1.0, 0 ng/レーン）
転写条件： EzFastBlot, 24V, 15分
ブロッキング：EzBlockCAS, 30分間
【Transferrinの検出】
1次抗体：抗ヒトトランスフェリンウサギポリクローナル抗体
2次抗体：Alexa 647 標識抗ウサギIg抗体
【Actinの検出】
抗体：Rhodamine標識抗ヒトアクチン抗体撮影装置：LuminoGraphⅢLite

HeLa細胞抽出タンパク質に1レーン当たり０～10 ngのTransferrinを添加したサンプルをu-PAGEL Hで泳動分離し、ウェスタンブロッティング反応後に、LuminoGraphⅢLiteで撮影した結果を示しています。グラフは各画像データをCSAnalyzer 4で解析し、全タンパク質およびハウスキーピングタンパク質（Actin）のシグナル値をもとに、トランスフェリンの量をノーマライズした結果です。いずれの方法でノーマライズした場合も、トランスフェリンの添加量に応じた結果がえられました。このようにLuminoGraphⅢLiteは様々な蛍光による蛍光ウェスタンブロッティングの結果を、感度よく、S/N比の高い、高解像度のイメージとして撮影できます。

ProQ Diamondでリン酸化タンパク質を検出した後に、同じゲルをSYPRO Rubyで染色した結果を示しています。重ね合わせたイメージはCS Analyzerで作成しました。

サンプル

Lane 1, 14: EzProtein Ladder
Lane 2, 13: EzStandard Ⅱ
Lane 3, 12: EzLabelFluoroNeo添付マーカー
Lane 4, 5: Chick muscle protein
Lane 6, 7: E. Coli extract protein
Lane 8, 9: HeLa cell extract protein
Lane 10, 11: Chick muscle protein